飽和結構照明顯微鏡(SSIM),是在結構照明顯微鏡(SIM)的基礎上發(fā)展而來,在激發(fā)模式中引入亞衍射極限空間特征,將飽和過程概念應用于結構照明顯微技術,從而突破衍射極限獲得超高分辨率圖像,屬于超分辨率顯微鏡的一種。
2000年,結構照明顯微技術被提出。結構照明顯微鏡(SIM),應用圖案化照明場,空間分辨率得到提高,憑借細胞損傷極小的優(yōu)勢,非常適合長時間觀察活細胞。但由于受到光衍射限制,結構照明顯微鏡X-Y軸分辨率最高只能達到100nm。
2002年,飽和結構照明顯微技術被提出,2005年,飽和結構照明顯微鏡被開發(fā)問世。飽和結構照明顯微鏡,利用高強度激發(fā)光照射熒光,熒光分子趨于飽和,在這種情況下,熒光分子每次回到基態(tài)就會立即被激發(fā)到激發(fā)態(tài),這種激發(fā)模式空間頻率更高,與樣本中的高頻空間混合,可以將亞衍射極限空間特征引入到顯微鏡的檢測范圍,從而獲得超高分辨率圖像。
為進一步提高性能、拓寬應用范圍,飽和結構照明顯微鏡技術不斷改進。2009年,科研人員將隨機光學重建顯微技術(STORM)、光激活定位顯微技術(PALM)與飽和結構照明顯微技術相結合,使得飽和結構照明顯微鏡的三維分辨率進一步提升到20nm以內(nèi)。
新思界
行業(yè)分析人士表示,預計2023年,全球超分辨率顯微鏡市場規(guī)模約為62.9億元。現(xiàn)階段常見的超分辨率顯微鏡主要是受激發(fā)射損耗顯微鏡(STED)、隨機光學重建顯微鏡(STORM)、光激活定位顯微鏡(PALM)、結構照明顯微鏡(SIM)、飽和結構照明顯微鏡(SSIM)等,這些技術各有優(yōu)缺點,應用領域存在差異,雖然受激發(fā)射損耗顯微鏡目前應用比例較高,但并沒有一種技術具有明顯競爭優(yōu)勢,因此飽和結構照明顯微鏡未來仍有發(fā)展空間。