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          cRNA探針在原位雜交中應用廣泛 在科研領域前景良好

          2024-03-30 16:46      責任編輯:周圓    來源:www.heb-baidu.cn    點擊:
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          cRNA探針在原位雜交中應用廣泛 在科研領域前景良好

            cRNA探針,是以cDNA為模板,通過體外轉錄獲得cRNA制備而成的一種單鏈探針,是一種核酸探針,屬于RNA探針。
           
            cRNA探針的制備過程是,從組織或細胞中提取mRNA,經逆轉錄作用獲得cDNA,對cDNA進行克隆并連接到載體上,以克隆的cDNA為模板,以含有標記物的核苷酸為原料,進行體外轉錄產生cRNA。在此過程中,cRNA的轉錄方向可以控制,能夠獲得帶有標記物的與mRNA同序列的同義cRNA探針,或者與mRNA互補的反義cRNA探針。
           
            cRNA探針的工作原理是,利用cRNA探針與樣品核酸分子進行雜交,若樣品中含有與cRNA探針互補的核酸序列(即目標核酸序列),則二者相互作用通過氫鍵緊密相連形成雙鏈,洗去未雜交的多余cRNA探針,基于標記物的自顯影或者發光作用對樣品進行檢測,獲得目標核酸序列相關信息,即利用與cRNA探針檢測出與之互補的核酸序列。
           
            根據新思界產業研究中心發布的《2024-2028年cRNA探針行業深度市場調研及投資策略建議報告》顯示,cRNA探針是一種單鏈探針,不存在雙鏈探針存在的與目標核酸序列雜交結合的有效探針數量減少,導致雜交效率與檢測靈敏度降低的弊端,具有雜交效率高的優點,在分子雜交領域應用廣泛,特別是在原位雜交中應用比例較高。
           
            采用cRNA探針雜交形成的雙鏈穩定性高,不會受RNA酶影響,而cRNA探針本身對RNA酶敏感,會被破壞,因此可以利用RNA酶來清除未雜交的多余cRNA探針,以排除干擾,便于后續對樣品進行探測觀察。
           
            cRNA探針可應用范圍廣泛,包括檢測同種基因在不同條件下的表達水平、協助注釋未知基因組區域、研究基因組復制機制、檢測病毒的存在以及含量等。例如,利用地高辛標記的cRNA探針,在胰腺切片上進行原位雜交,可用來檢測胰島素基因表達產物mRNA,結果可靠性高。但cRNA探針制備過程較為復雜,對實驗設備、試驗環境、實驗人員技術要求較高。
           
            新思界行業分析人士表示,與歐美國家相比,我國基因研究起步較晚,但發展迅速,部分技術已經達到或接近國際先進水平。同時,為實現疾病早發現、早治療以及精準治療,我國基因測序行業迅速崛起,特別是高通量測序(NGS)發展速度快,倒推基因研究技術不斷進步。在此背景下,我國市場對核酸探針需求不斷增長,cRNA探針作為核酸探針的一種,未來市場前景良好。
           
          關鍵字: 核酸探針 RNA探針 cRNA探針

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